Добро пожаловать в медицинские центры системы современных семейных клиник доктора Войта в Санкт-Петербурге
Профессиональная вертебрология и дерматология, комфортная гинекология, урология, проктология и другие направления
Клиника доктора Войта
Отделение дерматологии и косметологии
За последние годы отмечается рост заболеваемости такими дерматозами как чесотка и микозы. Нередкое отсутствие доступной лабораторной базы, стертое клиническое течение, а также необоснованное назначение ряда лекарственных препаратов затрудняют постановку правильного диагноза. В последнее время широкое распространение получили топические стероиды, обладающие выраженной противовоспалительной активностью. Их применение, не всегда оправданное (особенно при неустановленном диагнозе), часто приводит к стертому или атипичному течению дерматозов и, как следствие, диагностическим ошибкам. В таких случаях помогает микроскопия, не требующая значительных материальных затрат, но позволяющая быстро и эффективно выставить правильный диагноз.
Особое значение приобретает микроскопическая диагностика онихомикозов, поскольку довольно часто встречаются ониходистрофии, клинически не отличимые от грибковых поражений ногтевых пластинок. Лечение, назначаемое только на основании клинических данных, может быть ошибочным и привести к существенным материальным затратам пациента, а также негативно отразиться на его здоровье ввиду токсичности большинства системных антимикотиков. Высокая стоимость, а в ряде случаев недоступность культуральной диагностики, делают предпочтительным использование микроскопической диагностики микозов и, прежде всего, онихомикозов.
1. Микроскопическая диагностика микозов
1.1. Взятие материала для исследования
Микроскопическая диагностика микозов подразумевает обнаружение мицелия и спор в исследуемом биоматериале. В качестве исследуемого биоматериала рассматриваются чешуйки эпидермиса, волосы и ногти. Непременным требованием перед проведением исследования является отсутствие местного лечения в течение как минимум десяти дней и системного лечения - в течение месяца.
При подозрении на микоз гладкой кожи, микоз кистей и стоп без поражения ногтевых пластинок исследуются чешуйки эпидермиса с поверхности очага поражения. При микозе гладкой кожи является предпочтительным исследование эпидермиса с краевой зоны очага поражения, так как в центральной зоне патологический процесс нередко разрешается. При этом не следует забывать о возможности поражения пушковых волос, что определяет дальнейшую тактику лечения. При микозе кистей и стоп без поражения ногтевых пластинок исследуются чешуйки эпидермиса из третьей и четвертой межпальцевых складок, а также с ладоней со свода стоп.
При подозрении на грибковое поражение длинных волос (волосистой части головы, бороды, усов и лобка), а также пушковых волос выполняется их микроскопическое исследование. При трихофитии волосистой части головы волосы обламываются на расстоянии 1-2 мм над уровнем устья волосяного фолликула, напоминая при этом пеньки, точки и запятые. При микроспории волосистой части головы волосы обламываются на высоте 5-6 мм, напоминая "скошенный луг". При микроскопии исследуются именно эти обломанные волосы. Волосы из очагов поражения извлекают с помощью пинцета.
При подозрении на онихомикоз исследуется легко измельчающийся материал из зоны подногтевого гиперкератоза, а также сами измененные ногтевые пластинки.
1.2. Приготовление препарата
После получения чешуек эпидермиса с очага поражения производится приготовление препарата для микроскопического исследования. На исследуемый материал, помещенный на предметное стекло, наносятся 1-2 капли 20% КОН, после чего предметное стекло подогревается над пламенем горелки до появления белесоватого ободка кристаллизованной щелочи по периферии. Затем образец накрывается покровным стеклом, покровное стекло придавливается препаровальной иглой и препарат микроскопируется.
Способ приготовления препарата волоса при подозрении на его грибковое поражение соответствует ранее описанному, с той лишь разницей, что покровное стекло не придавливается препаровальной иглой (чтобы избежать раздавливания волоса).
Для приготовлении препарата кусочки срезанных ногтевых пластинок опускаются в пробирку с 20% КОН и экспонируются в термостате в течение суток, а затем получившаяся желеобразная масса переносится на предметное стекло, накрывается покровным и микроскопируется. В отличие от ногтевых пластинок образцы из легко измельчающегося материала зоны подногтевого гиперкератоза помещают на предметное стекло, на них наносят 1-2 капли 20% КОН, после чего предметное стекло подогревают над пламенем горелки до появления белесоватого ободка кристаллизованной щелочи по периферии. Затем образец накрывают покровным стеклом, которое придавливают препаровальной иглой, и приготовленный препарат исследуют под микроскопом.
1.3. Микроскопия препарата
Микроскопия чешуек эпидермиса, чешуек из зоны подногтевого гиперкератоза, а также растворенных ногтевых пластинок производится вначале на малом увеличении (?100), а при обнаружении ниточек мицелия, напоминающих "карту рек" (железных дорог), объектив переводится на среднее увеличение (?400). Мицелий на среднем увеличении напоминает причудливой формы стеклянные палочки, изменяющие степень преломления света при работе микровинтом микроскопа.
Микроскопия препарата волоса производится сразу на среднем увеличении (?400). При трихофитии внутри волоса обнаруживаются крупные споры, тогда как при микроспории внутри волоса имеется множество мелких компактно расположенных спор (отсюда термин "микроспория"), а снаружи - чехлик из таких же мелких спор. При микроскопии пораженных волос при фавусе, внутри волоса кроме скоплений спор круглой или многоугольной формы, обнаруживаются пузырьки воздуха и нити мицелия.
Препараты необходимо просмотреть не позднее 2 часов с момента их приготовления из-за возможности кристаллизации щелочи. Для повышения надежности диагностики следует сделать несколько препаратов (не менее двух) из одного очага поражения. Возможные ошибки при микроскопической диагностике микозов могут быть связаны как с некачественным приготовлением препаратов (перегревом над пламенем горелки, что сопровождается преждевременной кристаллизацией щелочи), а также с недостаточным опытом исследователя (когда за нити мицелия нередко принимают волокна ткани, случайно оказавшейся в образце).
1.4. Обработка отработанных препаратов
Отработанные стекла (отдельно предметные и покровные) помещают в раствор "Аналита" и моющего средства "Лотос" (из расчета на 1 литр "Аналита" 10 грамм моющего средства "Лотос") на 1,5 часа. Затем их промывают в течение 10 минут под проточной водой и в течение 10 минут в дистиллированной воде. После чего подсушивают 30 минут в термостате при температуре 80 ?С. Далее их раскладывают в крафт-пакеты и стерилизуют в сухожаровом шкафу при температуре 180 ?С в течение часа.
2. Микроскопическая диагностика чесотки
2.1. Взятие материала для исследования
Необходимым требованием перед проведением исследования является отсутствие любого местного лечения в течение 10 дней. Для микроскопической диагностики чесотки предложено много различных способов, но, наш взгляд, наиболее предпочтительным является способ щелочного препарирования. Методика щелочного препарирования включает: нанесение 1-2 капель 10% КОН на предположительную область чесоточного хода, затем после непродолжительного экспонирования (в течение 1-2 минут) выполняется соскоб эпидермиса с исследуемого участка кожи (до появления крови).
2.2. Приготовление и микроскопия препарата
Исследуемый материал переносят на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют вначале на среднем увеличении (?100), а затем на большом (?400). При необходимости приготавливают несколько препаратов из очагов поражения различных локализаций. В случае положительного результата при микроскопии можно обнаружить: чесоточного клеща (Sacroptes scabiei), яйца чесоточного клеща, скорлупу яиц и вылупившиеся нимфы.
2.3. Обработка отработанных препаратов
Отработанные стекла (отдельно предметные и покровные) помещают в раствор "Аналита" и моющего средства "Лотос" (из расчета на 1 литр "Аналита" 10 грамм моющего средства "Лотос") на 1,5 часа. Затем их промывают в течение 10 минут под проточной водой и в течение 10 минут в дистиллированной воде. После чего подсушивают 30 минут в термостате при температуре 80 ?С. Далее их раскладывают в крафт-пакеты и стерилизуют в сухожаровом шкафу при температуре 180С в течение часа.
Клиника доктора Войта.
